檢測項目

自噬驗證的核心檢測項目包含三類關(guān)鍵指標：第一類為自噬體形成標志物L(fēng)C3-II/LC3-I比值測定，通過定量分析該蛋白的脂化修飾程度反映自噬流活性；第二類為選擇性自噬底物p62/SQSTM1的蛋白降解水平檢測，其積累程度與自噬溶酶體功能呈負相關(guān)；第三類涵蓋ATG5、Beclin-1等自噬相關(guān)基因的mRNA及蛋白表達量分析。

進階檢測項目包括溶酶體酸性磷酸酶活性測定、線粒體自噬特異性標志物Parkin/PINK1通路分析以及通過mRFP-GFP-LC3雙熒光系統(tǒng)進行的自噬流動態(tài)監(jiān)測。針對特定研究需求可擴展線粒體膜電位檢測、溶酶體膜通透性評估等配套指標。

檢測范圍

本檢測體系適用于哺乳動物細胞系（HEK293、HeLa等）、原代培養(yǎng)細胞（神經(jīng)元、肝細胞等）、動物組織樣本（腦、肝、腎等器官）及臨床病理標本。在疾病研究領(lǐng)域重點覆蓋神經(jīng)退行性疾病（阿爾茨海默病、帕金森?。⒛[瘤微環(huán)境分析及代謝綜合征模型驗證。

特殊樣本處理方案包含：①石蠟包埋組織的抗原修復(fù)與免疫組化優(yōu)化 ②高脂含量樣本的透射電鏡前處理 ③低豐度蛋白樣本的信號放大技術(shù)應(yīng)用 ④活細胞實時成像系統(tǒng)的環(huán)境控制參數(shù)設(shè)定。

檢測方法

Western blotting作為基礎(chǔ)定量方法，采用12% SDS-PAGE分離LC3蛋白異構(gòu)體，使用抗LC3B單克隆抗體（1:1000）及HRP標記二抗進行化學(xué)發(fā)光顯影。標準化流程包含β-actin內(nèi)參校正和三次獨立實驗重復(fù)。

免疫熒光顯微鏡技術(shù)應(yīng)用共聚焦系統(tǒng)進行亞細胞定位分析，采用抗LAMP1抗體標記溶酶體膜與LC3斑點共定位計算。透射電子顯微鏡（TEM）執(zhí)行超薄切片雙盲觀察，依據(jù)國際標準識別直徑0.5-2μm的雙層膜結(jié)構(gòu)自噬體。

分子生物學(xué)方法包括：①qRT-PCR定量ATG基因表達（SYBR Green法）②CRISPR/Cas9基因編輯構(gòu)建ATG7敲除對照模型 ③流式細胞術(shù)檢測Cyto-ID熒光染料標記的自噬囊泡。

檢測儀器

核心儀器配置包含：①蛋白質(zhì)印跡系統(tǒng)（Bio-Rad Mini-PROTEAN Tetra電泳槽+ChemiDoc MP成像系統(tǒng)）②激光共聚焦顯微鏡（Nikon A1R HD25或同級配置）③場發(fā)射透射電鏡（JEOL JEM-1400Flash, 120kV）④實時熒光定量PCR儀（Applied Biosystems 7500 Fast）。

輔助設(shè)備涉及：①超速離心機（Beckman Optima XPN-100）②活細胞成像工作站（PerkinElmer Opera Phenix）③多功能酶標儀（Molecular Devices SpectraMax i3x）④液氮速凍系統(tǒng)（Leica EM VCM）。所有儀器均執(zhí)行ISO/IEC 17025校準規(guī)范，電鏡樣品制備室維持恒溫恒濕（22±1℃, 45%RH）。

檢測報告作用用作

銷售報告：出具正規(guī)第三方檢測報告讓客戶更加信賴自己的產(chǎn)品質(zhì)量，讓自己的產(chǎn)品更具有說服力。

研發(fā)使用：擁有優(yōu)秀的檢測工程師和先進的測試設(shè)備，可降低了研發(fā)成本，節(jié)約時間。

司法服務(wù)：協(xié)助相關(guān)部門檢測產(chǎn)品，進行科研實驗，為相關(guān)部門提供科學(xué)、公正、準確的檢測數(shù)據(jù)。

大學(xué)論文：科研數(shù)據(jù)使用。

投標：檢測周期短，同時所花費的費用較低。

準確性較高;工業(yè)問題診斷：較短時間內(nèi)檢測出產(chǎn)品問題點，以達到盡快止損的目的。

我們的承諾

　　北京中科光析科學(xué)技術(shù)研究所承諾：我們將根據(jù)不同產(chǎn)品類型的特點，并結(jié)合不同行業(yè)和國家的法規(guī)標準，選擇適當?shù)臋z測項目和方法進行分析測試，或根據(jù)您的要求進行試驗分析。為了不斷改進我們的工作，我們致力于提高產(chǎn)品質(zhì)控分析、使用性能檢測能力，并持續(xù)加強我們團隊的科研技術(shù)。同時，我們將積極跟進新的技術(shù)和標準，以最大程度地滿足您的需求和市場要求。