檢測(cè)項(xiàng)目

HPV8檢測(cè)是針對(duì)人乳頭瘤病毒第8型（Human Papillomavirus type 8）的特異性分子診斷項(xiàng)目。該病毒屬于α-乳頭瘤病毒屬的黏膜高危型別，其基因組包含早期蛋白編碼區(qū)（E6/E7）和晚期結(jié)構(gòu)蛋白編碼區(qū)（L1/L2）。臨床研究表明HPV8持續(xù)感染與皮膚鱗狀細(xì)胞癌、外陰上皮內(nèi)瘤變及免疫抑制患者的口咽部病變存在顯著相關(guān)性。

本檢測(cè)涵蓋病毒DNA的存在性確認(rèn)和病毒載量定量?jī)蓚€(gè)維度：通過特異性引物識(shí)別E6/E7開放閱讀框保守區(qū)域?qū)崿F(xiàn)型別鑒定；采用實(shí)時(shí)熒光定量技術(shù)測(cè)定病毒拷貝數(shù)/細(xì)胞數(shù)比值評(píng)估感染程度。區(qū)別于常規(guī)HPV分型檢測(cè)的篩查性質(zhì)，本方案特別強(qiáng)化對(duì)低載量樣本（<50 copies/μl）的檢出能力并設(shè)置雙重驗(yàn)證機(jī)制。

檢測(cè)范圍

本檢測(cè)適用于以下臨床場(chǎng)景：1）外陰/肛周皮膚出現(xiàn)鮑溫樣丘疹病或色素性皮損患者的病原學(xué)鑒別；2）宮頸細(xì)胞學(xué)檢查（TCT）顯示低級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）且常規(guī)HPV分型陰性者的補(bǔ)充檢測(cè)；3）器官移植受者或HIV感染者皮膚黏膜異常增生監(jiān)測(cè)；4）皮膚鱗癌組織標(biāo)本的病因?qū)W溯源研究。

樣本類型包括但不限于：宮頸脫落細(xì)胞保存液（需使用ThinPrep或SurePath專用保存介質(zhì)）、皮膚/黏膜組織活檢標(biāo)本（福爾馬林固定石蠟包埋或新鮮冷凍）、口腔拭子（采集后立即置于核酸穩(wěn)定液中）。對(duì)于免疫組化提示p16蛋白過表達(dá)的病例建議優(yōu)先送檢。

檢測(cè)方法

實(shí)驗(yàn)室采用三級(jí)遞進(jìn)式檢測(cè)體系：初篩階段使用多重PCR-反向點(diǎn)雜交法快速篩查14種高危型別；復(fù)核階段對(duì)HPV8可疑陽性樣本進(jìn)行巢式PCR擴(kuò)增（引物設(shè)計(jì)覆蓋E6基因nt342-598區(qū)域）；確診階段采用Sanger測(cè)序法比對(duì)NCBI GenBank中HPV8參考序列（登錄號(hào)X74463.1）。

病毒載量測(cè)定執(zhí)行ISO 15189認(rèn)證的實(shí)時(shí)熒光定量PCR方案：以E7基因?yàn)榘袠?biāo)設(shè)計(jì)TaqMan探針（5'-FAM-CCGGTCCGAGGACGA-BHQ1-3'），標(biāo)準(zhǔn)曲線采用含有HPV8全基因組的質(zhì)粒梯度稀釋液（10^1-10^7 copies/μl），內(nèi)參基因選用人類β-globin確保細(xì)胞數(shù)量校正。擴(kuò)增程序包括95℃預(yù)變性10分鐘，隨后45個(gè)循環(huán)的95℃ 15秒/60℃ 60秒。

檢測(cè)儀器

核心設(shè)備配置如下：1）核酸提取工作站（Roche MagNA Pure 96 System），具備防氣溶膠污染設(shè)計(jì)和內(nèi)置紫外消毒模塊；2）梯度PCR儀（Bio-Rad T100 Thermal Cycler），支持快速升降溫程序（最大速率6℃/s）；3）實(shí)時(shí)熒光定量系統(tǒng)（ABI QuantStudio 5），配備5色光學(xué)通道滿足多重檢測(cè)需求；4）毛細(xì)管電泳儀（ABI 3500xL Genetic Analyzer），用于擴(kuò)增產(chǎn)物的片段分析及測(cè)序驗(yàn)證。

質(zhì)控體系包含三個(gè)層級(jí)：每批次實(shí)驗(yàn)設(shè)置陰性對(duì)照（無模板對(duì)照）、陽性對(duì)照（HPV8標(biāo)準(zhǔn)株DNA）和抑制對(duì)照（添加已知濃度內(nèi)源基因）；每月執(zhí)行一次室間質(zhì)評(píng)樣本檢測(cè)（CAP HPV8 Proficiency Testing Program）；年度參與WHO HPV LabNet全球標(biāo)準(zhǔn)化比對(duì)試驗(yàn)確保結(jié)果溯源性。

檢測(cè)報(bào)告作用用作

銷售報(bào)告：出具正規(guī)第三方檢測(cè)報(bào)告讓客戶更加信賴自己的產(chǎn)品質(zhì)量，讓自己的產(chǎn)品更具有說服力。

研發(fā)使用：擁有優(yōu)秀的檢測(cè)工程師和先進(jìn)的測(cè)試設(shè)備，可降低了研發(fā)成本，節(jié)約時(shí)間。

司法服務(wù)：協(xié)助相關(guān)部門檢測(cè)產(chǎn)品，進(jìn)行科研實(shí)驗(yàn)，為相關(guān)部門提供科學(xué)、公正、準(zhǔn)確的檢測(cè)數(shù)據(jù)。

大學(xué)論文：科研數(shù)據(jù)使用。

投標(biāo)：檢測(cè)周期短，同時(shí)所花費(fèi)的費(fèi)用較低。

準(zhǔn)確性較高;工業(yè)問題診斷：較短時(shí)間內(nèi)檢測(cè)出產(chǎn)品問題點(diǎn)，以達(dá)到盡快止損的目的。

我們的承諾

　　北京中科光析科學(xué)技術(shù)研究所承諾：我們將根據(jù)不同產(chǎn)品類型的特點(diǎn)，并結(jié)合不同行業(yè)和國(guó)家的法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)，選擇適當(dāng)?shù)臋z測(cè)項(xiàng)目和方法進(jìn)行分析測(cè)試，或根據(jù)您的要求進(jìn)行試驗(yàn)分析。為了不斷改進(jìn)我們的工作，我們致力于提高產(chǎn)品質(zhì)控分析、使用性能檢測(cè)能力，并持續(xù)加強(qiáng)我們團(tuán)隊(duì)的科研技術(shù)。同時(shí)，我們將積極跟進(jìn)新的技術(shù)和標(biāo)準(zhǔn)，以最大程度地滿足您的需求和市場(chǎng)要求。