檢測項(xiàng)目

熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)主要應(yīng)用于以下研究領(lǐng)域：

• 啟動子/增強(qiáng)子活性分析：通過將目標(biāo)調(diào)控序列與熒光素酶基因連接構(gòu)建報(bào)告載體，定量評估其對基因表達(dá)的調(diào)控作用
• miRNA靶標(biāo)驗(yàn)證：利用3'UTR區(qū)插入預(yù)測靶序列的報(bào)告系統(tǒng)驗(yàn)證miRNA與mRNA的相互作用
• 信號通路活化監(jiān)測：采用特定轉(zhuǎn)錄應(yīng)答元件（如NF-κB響應(yīng)元件）構(gòu)建的報(bào)告系統(tǒng)評估通路激活狀態(tài)
• 藥物篩選平臺建立：基于特定調(diào)控元件的報(bào)告系統(tǒng)進(jìn)行化合物庫高通量篩選
• 蛋白質(zhì)相互作用研究：結(jié)合分裂熒光素酶系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)互作的實(shí)時監(jiān)測

檢測范圍

本技術(shù)適用于多種生物體系和研究場景：

• 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究：疾病相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子功能解析、表觀遺傳調(diào)控機(jī)制探索
• 藥物開發(fā)領(lǐng)域：化合物作用靶點(diǎn)驗(yàn)證、藥物毒性評價(jià)體系構(gòu)建
• 環(huán)境毒理學(xué)研究：污染物對特定信號通路的影響評估
• 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)：植物抗逆相關(guān)基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)解析
• 微生物工程：原核/真核表達(dá)系統(tǒng)優(yōu)化及代謝通路改造驗(yàn)證

檢測方法

標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)驗(yàn)流程包含以下關(guān)鍵步驟：

1. 質(zhì)粒構(gòu)建與轉(zhuǎn)染優(yōu)化
   • 設(shè)計(jì)含多克隆位點(diǎn)的報(bào)告載體骨架
   • 插入目標(biāo)DNA片段并進(jìn)行測序驗(yàn)證
   • 通過脂質(zhì)體法或電穿孔法進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染
   • 設(shè)置內(nèi)參載體（如海腎熒光素酶）進(jìn)行轉(zhuǎn)染效率校正
2. 細(xì)胞處理與裂解條件優(yōu)化
   • 根據(jù)細(xì)胞類型選擇適當(dāng)培養(yǎng)時間（通常24-48小時）
   • 采用被動裂解緩沖液（PLB）進(jìn)行細(xì)胞裂解處理
   • 控制裂解時間（15-30分鐘）及溫度（室溫）保證酶活性穩(wěn)定
3. 熒光素酶活性測定
   • 配置新鮮底物工作液（Luciferin+ATP+輔因子）
   • 使用化學(xué)發(fā)光儀進(jìn)行連續(xù)光信號采集（積分時間0.5-10秒）
   • 設(shè)置空白對照（未轉(zhuǎn)染細(xì)胞）進(jìn)行背景扣除
4. 數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)化處理
   • 計(jì)算實(shí)驗(yàn)組與內(nèi)參組的發(fā)光強(qiáng)度比值（Firefly/Renilla）
   • 采用Z-factor評估實(shí)驗(yàn)體系可靠性（＞0.5為合格）
   • 通過三次獨(dú)立重復(fù)實(shí)驗(yàn)獲取統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著結(jié)果

檢測儀器

完成實(shí)驗(yàn)需配置以下核心設(shè)備：

• 化學(xué)發(fā)光檢測儀：配備光電倍增管（PMT），靈敏度需達(dá)到10^-18-10^-15mol/L檢測限
• 熒光顯微鏡系統(tǒng)：用于轉(zhuǎn)染效率評估及細(xì)胞狀態(tài)觀察（配備GFP/RFP濾光片組）
• 多功能酶標(biāo)儀：支持96/384孔板的高通量檢測模式（溫度控制精度0.5℃）
• 細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備組套：包括CO₂培養(yǎng)箱（溫度波動＜0.2℃）、生物安全柜及倒置顯微鏡等基礎(chǔ)設(shè)備
• 核酸定量系統(tǒng)：紫外分光光度計(jì)或Qubit熒光定量儀用于質(zhì)粒濃度測定（檢測范圍

  檢測報(bào)告作用

  檢測報(bào)告作用

  銷售報(bào)告：出具正規(guī)第三方檢測報(bào)告讓客戶更加信賴自己的產(chǎn)品質(zhì)量，讓自己的產(chǎn)品更具有說服力。

  研發(fā)使用：擁有優(yōu)秀的檢測工程師和先進(jìn)的測試設(shè)備，可降低了研發(fā)成本，節(jié)約時間。

  司法服務(wù)：協(xié)助相關(guān)部門檢測產(chǎn)品，進(jìn)行科研實(shí)驗(yàn)，為相關(guān)部門提供科學(xué)、公正、準(zhǔn)確的檢測數(shù)據(jù)。

  大學(xué)論文：科研數(shù)據(jù)使用。

  投標(biāo)：檢測周期短，同時所花費(fèi)的費(fèi)用較低。

  準(zhǔn)確性高;工業(yè)問題診斷：較短時間內(nèi)檢測出產(chǎn)品問題點(diǎn)，以達(dá)到盡快止損的目的。

  我們的承諾

  　　北京中科光析科學(xué)技術(shù)研究所承諾：我們將根據(jù)不同產(chǎn)品類型的特點(diǎn)，并結(jié)合不同行業(yè)和國家的法規(guī)標(biāo)準(zhǔn)，選擇適當(dāng)?shù)臋z測項(xiàng)目和方法進(jìn)行分析測試，或根據(jù)您的要求進(jìn)行試驗(yàn)分析。為了不斷改進(jìn)我們的工作，我們致力于提高產(chǎn)品質(zhì)控分析、使用性能檢測能力，并持續(xù)加強(qiáng)我們團(tuán)隊(duì)的科研技術(shù)。同時，我們將積極跟進(jìn)新的技術(shù)和標(biāo)準(zhǔn)，以最大程度地滿足您的需求和市場要求。